法匹拉韋中有關物質的HPLC法測定
ZORBAX 80Å StableBond
色譜柱性能指標
鍵合相孔徑比表面積溫度上限* pH 范圍* 封端碳載量
性能指標只代表典型值
法匹拉韋 分析液相柱 880975-902
*StableBond 色譜柱是為在低pH 條件下優化使用而設計的。在pH 6-8,操作溫度<40ºC,且使用濃度范圍為0.01-0.02M 的低濃度緩沖液時,所有硅膠基色譜柱均可得到gao的柱穩
定性。對于中等pH 值范圍,建議使用Eclipse XDB 和Bonus-RP。
• 低pH 范圍(低到pH 1)分離時具有長的柱壽命和的重現性
• Zhuan利的穩定色譜柱固定相允許其在高溫、低pH 條件下使用而不發生降解
• 六種不同的鍵合相提供了廣泛的選擇性——SB-C18、SB-C8、SB-CN、SB-Phenyl、
SB-C3 和SB-Aq
• 高純度(B 型)硅膠保證了良好的峰形
Agilent ZORBAX StableBond 色譜柱使用Zhuan利的、*的、單官能團硅烷,其具有較大的二異丁基(SB-C18) 或二異丙基(SB-C8、SB-C3、SB-Phenyl、SB-CN 和SB-Aq)側鏈基團,空間位阻關鍵的硅氧烷鍵合到硅膠表面,以避免在低pH 條件下水解破壞。為了在酸性流動相條件下提供良好的穩定性并使壽命長,重現性較好,StableBond 填料不封端。高純度、低酸度的硅膠為酸性、堿性和中性化合物提供了出色的峰形,因此使得StableBond色譜柱成為低pH 方法開發的Shou選。ZORBAX StableBond 色譜柱可與所有常用流動相兼容,包括水含量很高的流動相。
摘要目的: 建立測定法匹拉韋有關物質的HPLC 法。
方法: 色譜柱為Agilent Zorbax SB-C18( 250mm × 4.6mm,5.0um) ;
流動相為磷酸緩沖液( 取磷酸二氫鉀1. 4 g,加水至1 000 ml,用磷酸調節pH 至4.0 ± 0.05) -乙腈( 90∶ 10) ; 檢測波長為238 nm;
流速為1. 0 ml·min - 1 ; 柱溫為30℃,進樣量為20L。結果: 在選定的色譜條件下,各雜質峰與主峰分離度良好; 法匹拉韋、雜質1、雜質2、雜質3、雜質4 范圍內與峰面積呈
良好的線性關系( r≥0. 999 6) ; 雜質1、雜質2、雜質3、雜質4 的平均回收率分別為98. 6%、97. 8%、99. 7%、100. 8%,RSD 分別
為1. 6%、2. 5%、1. 8%、2. 8%( n = 9) 。結論: 該方法靈敏度高、精密度好、專屬性強,可用于法匹拉韋有關物質的檢測。
Agilent ZORBAX StableBond 色譜柱
低pH 范圍(低到pH 1)分離時具有長的柱壽命和醉好的重現性
磚利的穩定色譜柱固定相允許其在高溫、低pH 條件下使用而不發生降解
六種不同的鍵合相提供了廣泛的選擇性——SB-C18、SB-C8、SB-CN、SB-Phenyl、SB-C3 和SB-Aq
StableBond 色譜柱是為在低pH 條件下優化使用而設計的。在pH 6-8,操作溫度<40ºC,且使用濃度范圍為0.01-0.02M 的低濃度緩沖液時,所有硅膠基色譜柱均可得到醉高的柱穩定性、高純度(B 型)硅膠保證了良好的峰形
Agilent ZORBAX StableBond 色譜柱使用磚利的、*的、單官能團硅烷,其具有較大的二異丁基(SB-C18) 或二異丙基 側鏈基團,空間位阻關鍵的硅氧烷鍵合到硅膠表面,以避免在低pH 條件下水解破壞。為了在酸性流動相條件下提供良好的穩定性并使壽命長,重現性家,StableBond 填料不封端。高純度、低酸度的硅膠為酸性、堿性和中性化合物提供了出色的峰形,因此使得StableBond色譜柱成為低pH 方法開發的手選。ZORBAX StableBond 色譜柱可與所有常用流動相兼容,包括水含量很高的流動相。
法匹拉韋 分析液相柱 880975-902
在使用流動相沖洗色譜柱后,測量甲苯的保留時間(其作為色譜柱損壞的指標)。在極低PH (0.8) 和高溫(90°C) 條件下工作三個月后,只有StableBond SB-C18 未發生變化。ZORBAX Rx-C18 還可提供穩定的基質,并且可以用作StableBond SB-C18 的替代產品。
雙封端、密集鍵合和耐用的Rx-Sil 填料(溶膠型)相結合,與此處所用的單封端凝膠硅膠柱相比,在pH 7 條件下的壽命更長。該分析所用的條件——高溫(60°C) 和高鹽濃度(250 mM),加快了硅膠的溶解,造成溶膠-凝膠型硅膠色譜柱過早失效。
Eclipse XDB 色譜柱在較寬的pH 范圍內有良好的穩定性。pH 較低時,封端的Eclipse 色譜柱特別穩定,pH 3 時與未封端的SB-C8 色譜柱的穩定性相當。這種色譜柱可在60ºC 用pH 3 的流動相沖洗。然后用強堿性化合物測定。以確定封端或鍵合固定相是否從硅膠表面水解。在12000 倍柱體積的測試之后耦米替零(amitriptyline) 的保留時間沒有變化,說明Eclipse XDB 色譜柱非常穩定。在這些相同條件下,另一種封端的色譜柱顯示出較差的穩定性。