【檢驗原理】
蛋白胨和牛肉gao粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;膽鹽抑制革蘭氏陽性菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫的產生;顯色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷與阪崎腸桿菌中的α-葡萄糖苷酶發生反應,水解底物,釋放出5-溴-4-氯-3-吲哚基顯色基團,在淡黃色平板上產生綠-藍綠色的菌落。
【配方】
阪崎腸桿菌顯色培養基配方(每升):
蛋白胨 11g
牛肉gao粉 5g
氯化鈉 5g
檸檬酸鐵銨 1g
硫代硫酸鈉 1g
膽鹽 1.5g
5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g
瓊脂 15g
終pH 7.3±0.2
【使用方法】
1. 取瓶內阪崎腸桿菌顯色培養基干粉39.6克,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min;冷卻至50℃,搖勻倒平板。在室溫可保存一天或在冰箱里貯存數天(避光,4℃)。
2. 取樣品333克按MPN三管法分別取100克、10克和1克分裝在各三個2000ml、250ml和100ml的三角瓶中,在三角瓶中已裝有經45℃預熱的9/10(樣品為1/10)的無菌蒸餾水或緩沖蛋白胨水,搖勻,在36℃培養18-22小時(SN和FDA方法)。
3. 各取10ml上述懸浮液加到裝有90mlEE肉湯(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中,在36℃/44℃增菌培養18-22小時。
4. 用劃線或涂布法把混勻的肉湯接種到阪崎腸桿菌顯色瓊脂平板上,35-37℃培養18-24小時。
5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管試驗,對疑似阪崎腸桿菌菌落進行生化鑒定。
【質量控制】
阪崎腸桿菌顯色培養基質量控制:
本品傾注平皿后呈淡黃色,菌株接種后36±1℃培養18-24小時
貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期二年。
規 格:可配置1L的培養基干粉。
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