【檢驗原理】
蛋白胨、胰酪胨提供氮源和碳源;氯化鈉維持滲透壓;瓊脂是培養基凝固劑;抑制劑和配套試劑B可抑制其它雜菌的生長;色素和配套試劑A可使單增李斯特氏菌形成藍綠色規測光滑的小菌落,周圍有乳白色脂肪沉淀環。
【配方成分】
成分 | 含量(每升) |
蛋白胨 | 28.0g |
胰酪胨 | 6.0g |
瓊脂粉 | 15.0g |
氯化鈉 | 5.0g |
色素 | 2.1g |
抑制劑 | 15.0g |
蒸餾水 | 1000mL |
終 pH | 7.0±0.2 |
【使用方法】
1. 平板凝膠培養基使用:待檢樣品按照相應的標準(GB、SN、FDA等)進行處理后,取適量樣品液接種于該培養基上,于36±1℃培養18~24 h,觀察結果,挑取典型可疑菌落進行鑒定。
2. 脫水干粉培養基使用:首先、稱取本品干粉7.11g,用95mL蒸餾水或去離子水溶解,攪拌加熱煮沸至*溶解,121℃高壓蒸汽滅菌15min;另外,稱取配套試劑A(SR0470)0.2g加入4ml蒸餾水或去離子水中,充分混勻成均一乳白色溶液(可借用磁力攪拌器或渦漩混合器) 121℃高壓蒸汽滅菌15min,之后冷至約50℃備用。接著,取1支配套試劑B(SR0470)分別加入1mL無菌水,使之*溶解。后,將配套試劑A和B加入到約50℃基礎培養基中,充分混勻后傾注無菌平皿,制成平板培養基備用。(注:配套試劑A在傾注平板前應與基礎和配套試劑B充分混勻,否則會影響菌落特征觀察。)
3. 瓶裝凝膠培養基使用:將1瓶裝凝膠培養基置于100℃水浴中加熱至*溶解后冷卻至50℃備用。取1支配套試劑B(SR0470)加入1mL無菌水,使之*溶解。將1瓶配套試劑A(4ml/瓶)和1支配套試劑B加入到約50℃的基礎培養基中,充分混勻后備用。(注:配套試劑A在傾注平板前應與基礎和配套試劑B充分混勻,否則會影響菌落特征觀察。)
【質量控制】
1. 外觀方面 脫水干粉培養基:淡黃色粉末; 配套試劑A:黃色粉末(或乳白色溶液);配套試劑B:白色凍干粉。 平板凝膠/瓶裝凝膠培養基:淡黃色凝膠。
2. 生物學方面 下列質控菌株接種待測試培養基,36℃±1℃培養24-48h,結果如下:
質控菌株及編號 | 指標 | 質控評判標準 |
單核細胞增生李斯特ATCC19115 | 生長率 | PR≥0.5,藍綠色光滑規則小菌落,周圍有乳白色脂肪沉淀環。 |
英諾克李斯特ATCC33090 | 特異性 | 藍色至藍綠色 |
大腸埃希氏菌ATCC25922 | 選擇性 | G≤1 |
糞腸球菌ATCC29212 |
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